摘要: 目的: 从组蛋白赖氨酸去甲基化酶4D(KDM4D)的角度探究隔药饼灸抑制结肠炎相关性结肠癌(CAC)肿瘤生长的效应机制。方法: 将近交系雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为正常组、CAC组、隔药饼灸组和 抑制剂组。除正常组外, 其余3组大鼠采用偶氮甲烷(AOM)联合葡聚糖硫酸钠(DSS)制备CAC大鼠模型。正常 组和CAC组不干预; 隔药饼灸组大鼠取气海和双侧天枢, 每次每穴灸2壮, 每日1次, 每周休息1 d, 共30 d; 抑 制剂组予以KDM4D抑制剂5-氯-8-羟基喹啉(5-c-8HQ)腹腔注射, 每日1次, 共30 d。干预后观察各组大鼠的一 般情况、结肠长度、瘤体数量和体积及结肠组织病理学变化。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测腺 瘤样息肉病基因(APC)、体轴抑制因子(Axin)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-7及 MMP-9 mRNA的表达。免疫组化法检测结肠组织增殖细胞核抗原(PCNA)、cleaved caspase3、KDM4D、APC 及Axin蛋白的表达。结果: 与正常组相比, CAC组大鼠一般情况较差, 结肠长度显著缩短(P<0.01), 结肠组织 瘤体数目增多、体积增大(P<0.01), 可见腺管结构明显紊乱, 出现“背靠背”及共壁现象, 高级别腺癌形成; CAC组结肠组织PCNA及KDM4D蛋白表达水平显著升高(P<0.01), cleaved caspase3、APC及Axin蛋白表达水平 显著降低(P<0.01), cyclin D1、MMP-7及MMP-9 mRNA表达水平显著升高(P<0.01), APC及Axin mRNA表达水平 显著降低(P<0.01)。与CAC组相比, 隔药饼灸组与抑制剂组大鼠的一般情况改善, 结肠长度显著增加(P<0.01), 结肠瘤体数目减少、体积缩小(P<0.05), 大鼠的结肠组织可见结肠上皮细胞增生, 核增大且深染, 异型增生, 炎性细胞浸润。隔药饼灸组与抑制剂组大鼠结肠组织PCNA及KDM4D蛋白表达水平显著降低(P<0.01), cleaved caspase3、APC及Axin蛋白表达水平显著升高(P<0.01), cyclin D1、MMP-7及MMP-9 mRNA表达降低 (P<0.05), APC及Axin mRNA表达升高(P<0.05)。结论: 隔药饼灸能调控CAC大鼠的KDM4D异常表达, 激活 Wnt/β-catenin通路上游APC和Axin分子, 抑制Wnt/β-catenin通路下游分子的异常激活, 这可能是隔药饼灸抑 制CAC肿瘤生长的关键机制之一。