目的 建立一种以MPT64为指标的结核分枝杆菌(MTB)耐药性检测的快速方法 ,探讨MPT64在MTB利福平(RFP)和异烟肼(INH)耐药性检测中的应用.方法 应用胶体金免疫层析法(GICA)分别检测MTB敏感株和耐多药株在含(观察组)与不含(对照组)RFP、INH的Middlebrook 7H9液体培养基上培养3、7、10 d的培养液中的MPT64,通过凝胶成像仪白光源拍照进行条带灰度分析(Image Jab Software 3.0),比较敏感株和耐多药株间的灰度比值的差异,依据受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分析确定RFP、INH耐药的灰度比值界值;以比例法检测结果 为金标准,评价新建方法 的准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值.结果 对照组中,随着培养时间的延长,12株MTB敏感株和11株耐多药株的灰度比值增大;观察组中,敏感株在不同的培养时间的灰度比值没有显著变化,而耐多药株则明显增大.3、7、10 d敏感菌与耐多药菌在药物培养基中MPT64检测灰度比值差异均有统计学意义(P均<0.05).依据观察组灰度比值分别绘制以MPT64指示的RFP和INH耐药性检测的ROC曲线,两者的3 d AUC分别为0.84和0.77,灰度比值界值均为0.05;7、10 d AUC均为1.00,7 d的灰度比值界值分别为0.23与0.20;10 d的灰度比值界值分别为0.49和0.48.GICA检测MPT64用于34株MTB的RFP、INH耐药性鉴定的准确度分别为97%和94%,灵敏度分别为93%和86%,特异度均为100%,阳性预测值均为100%,阴性预测值分别为95% 和91%.结论 GICA检测MPT64于MTB培养7 d时能准确检测抗结核药物RFP、INH耐药性,MPT64可作为MTB药敏试验的有效检测指标.