대구광역시 토양에서 채취한 토양 시료로부터 다양한 균주를 단리하고 그 중에서cellulase를 생산하는 특정 균주를 단리하기 위해 cellulose를 기질로 첨가하고, 염색시료로 0.02% trypan blue를 첨가한 LB고체배지 상에서 명확한 활성환을 형성하는 균주를 단리하였다. 단리한 균주 유래의 16S rRNA 유전자 염기서열 분석 결과 본 균주는 Lactobacillus murinus 로 동정되어, 본 균주를 L. murinus HP-01 로 명명하였다. L. murinus HP-01 는 37ºC 에서 150 rpm의 배양조건으로 배양하였을 때 배양 48시간에서 가장 높은 cellulase 를 생산하였고, L. murinus HP-01유래 cellulase의 cellulose 분해 조건을 검토한 결과 최적 pH와 온도는 각각 pH 5.0 그리고, 50℃ 로 검토되었다. 그리고 L. murinus HP-01 유래 cellulase는 각 조건에서 1시간동안 처리하여 효소안정성을 검토한 결과, pH 4.0-9.0 범위 그리고, 50℃의 온도까지 높은 안정성을 나타내었다. L. murinus HP-01 유래 cellulase의 다양한 cellulose 기질인 sigmacell cellulose, alpha-cellulose, swollen avicel cellulose에 대한 기질특이성을 검토한 결과 무결정 cellulose 기질인 CMC에 가장 높은 효소 활성을 나타내었으며, 결정 구조를 보유하고 있는 cellulose 기질에 대해서는 CMC 기질과 비교하여 상대적으로 낮은 효소 활성을 나타내었으며, 효소활성은 sigmacell cellulose, alpha cellulose, swollen avicel cellulose순으로 높게 나타났다.
The microorganisms producing cellulase were isolated from environmental soil of Duryu Park in Daegu, Korea. One strain producing cellulase was selected by forming an active zone on a trypan blue LB agar plate containing 0.5% carboxymethyl cellulose (CMC) and 0.02% trypan blue. In the analysis of 16S rRNA gene sequence from the strain, the isolated strain showed 99.43% of identity with Lactobacillus murinus so that the isolated strain was named Lactobacillus murinus HP-01. And then, isolated L. murinus HP-01 was cultivated on TSB-G medium including 0.5% CMC as a substrate. As a result, the strain showed the highest activity of cellulase after 2 days. In the effect of pH and temperature, cellulase from L. murinus HP-01 showed the highest activity at pH 5.0 and 50℃, respectively. On the optimal condition, the cellulase was found to be stable at pH ranging from 4.0 to 9.0, and it exhibited thermal stability with a half-life of 1.24 hours at 50 ℃. In the investigation of substrate specificity for cellulosic substrates, the specific activity of the cellulase from L. murinus HP-01 was highest for CMC, followed by sigmacell cellulose, alpha cellulose, swollen avicel cellulose.