目的 为了解生鲜乳中大肠杆菌生物特性及流行特点,本研究采集新疆北疆 3 个地区 6 个规模化牛场生鲜乳.方法 采用分离纯化、16S rRNA基因测序和构建系统进化树等方法对大肠杆菌进行分离鉴定;通过PCR 方法对分离株进行多位点序列分型(MLST)和 8 种耐药基因分析,利用微量肉汤稀释法和结晶紫染色法检测分离株对 13 种抗生素的耐药性和生物被膜形成能力,小鼠感染试验分析其致病性.结果 共分离鉴定了 7 株大肠杆菌,分离率38.9%,且具有不同程度致病性;7 株大肠杆菌分 3 个ST型,分别为ST183(57.1%)、ST58(28.6%)、ST49(14.3%);分离株对头孢曲松钠、头孢吡肟耐药率为 85.7%,对阿米卡星、庆大霉素、氧氟沙星耐药率分别为 71.4%、42.9%、14.3%;100%分离株携带 β-内酰胺类 blaTEM,71.4%菌株携带喹诺酮类 aac(6′)-Ib基因,42.8%的菌株携带 gyrA,71.4%的菌株携带四环素类 Tet(B)基因;KT株具有强生物被膜形成形成能力,SHZ1-1、SHZ2、SHZ3、SHZ4、YL 为中等生物被膜形成菌株,SHZ1-2 为弱成膜菌株.结论 表明分离于生鲜乳大肠杆菌具有多重耐药特点,并携带多种耐药基因,能形成较强生物被膜,该结果为评估新疆部分地区生鲜乳中大肠杆菌特点和临床用药提供理论依据.