As rodovias tem sido apontadas como uma das principais causas antropicas que influenciam na mortalidade da fauna silvestre. Aqui, nos investigamos o efeito da paisagem sobre a comunidade de mamiferos atropelados em um trecho de 50 km da rodovia GO-164, sul de Goias, Brasil. Nos dividimos o trecho em 10 quadrantes de 25 km² cada (unidades amostrais), nos quais obtivemos a abundância, riqueza e composicao de mamiferos atropelados em resposta a dois preditores da paisagem: distância para o curso-d’agua e percentual de cobertura vegetal nativa. Encontramos que a riqueza de mamiferos atropelados e maior, quanto menor a distância para o curso-d’agua, e que a composicao da fauna de mamiferos atropelados e influenciada pelo percentual de cobertura de vegetacao nativa na paisagem. Concluimos que ha uma variacao espacial dirigida pelas caracteristicas da paisagem, que influenciam na ocorrencia de atropelamentos de mamiferos. EFFECTS OF LANDSCAPE ON ROADKILL OF MEDIUM AND LARGE-SIZED MAMMALS IN SOUTHERN GOIAS, BRAZIL. The highways have been identified as one of the main anthropogenic causes that influences the mortality of wildlife. Here, we investigated the effects of landscape structure on the roadkill mammal species in a section of 50-km of the highway GO-164, southern Goias, Brazil. We divided the section of 10 quadrants of 25 km² (sampling units), in which we measured abundance, richness, and species composition of roadkill mammals in response to two predictors of the landscape: distance to the river and percentage of habitat amount. We found that the richness of roadkill mammals is higher closer to the river and that roadkill mammalian species composition is affected by the habitat amount in the landscape. We conclude that there is a spatial variation driven by the landscape characteristics, which influences the occurrence of mammal roadkill.