鸭腺病毒 3 型 Fiber-2 蛋白在酵母细胞中的表达及免疫原性研究.
- Resource Type
- Article
- Authors
- 史琪雯; 段进坤; 陈爽; 鲍恩东; 杨燚; 李守军; 马吉飞
- Source
- Journal of Nanjing Agricultural University / Nanjuing Nongye Daxue Xuebao. 2023, Vol. 46 Issue 1, p99-105. 7p.
- Subject
- *KLUYVEROMYCES marxianus
*GENE expression
*DUCK plague
*ANIMAL experimentation
*WESTERN immunoblotting
*ADENOVIRUSES
*IMMUNOGLOBULINS
*METABOLIC detoxification
- Language
- Chinese
- ISSN
- 1000-2030
[目的]利用马克斯克鲁维酵母 (Kluyveromyces marxianus) 系统高效表达鸭腺病毒 3 型 (DAdV-3) Fiber-2 蛋白,用于制备安全、高效、低成本的鸭腺病毒亚单位疫苗。[方法]以食品安全级的马克斯克鲁维酵母为宿主,对 DAdV-3 Fiber-2 蛋白进行重组表达,建立高密度发酵和纯化工艺,获得目的蛋白并制备成亚单位疫苗,然后进行动物试验。试验分为低剂量组 (琼扩效价 1:64,每羽 34 μg)、高剂量组 (1:128,每羽 68 μg)、空白组和攻毒对照组,在免疫后第 10 天和第 21 天采血检测血清中的抗体水平,攻毒 7 d 后采肛拭子检测排毒量; 通过抗体水平和排毒量评估该亚单位疫苗的保护效果。[结果]通过 SDS-PAGE、Western blot 和琼脂糖凝胶扩散 (AGP) 试验验证 fiber-2 基因在酵母中成功表达。重组菌经高密度发酵,目的蛋白纯化后检测其表达水平,琼扩效价可达 1:128。动物试验结果显示,疫苗免疫组在免疫后第 21 天所测得血清中的抗体水平显著高于空白组; 疫苗免疫组在攻毒 7 d 后的排毒量显著低于攻毒对照组。[结论] DAdV-3 Fiber-2 蛋白能在马克斯克鲁维酵母细胞中进行高效表达,并且用该蛋白制备的亚单位疫苗对鸭 3 型腺病毒具有一定的保护作用。 [ABSTRACT FROM AUTHOR]