米曲霉磷酸甲羟戊酸激酶功能研究.
- Resource Type
- Article
- Authors
- 尚怡彤; 闫欢欢; 王丽红; 田学琴; 薛萍红; 罗涛; 胡志宏
- Source
- Biotechnology Bulletin. 2023, Vol. 39 Issue 12, p311-319. 9p.
- Subject
- Language
- Chinese
- ISSN
- 1002-5464
磷酸甲羟戊酸激酶(PMK)是甲羟戊酸(MVA)途径的关键酶。在真菌中,MVA 途径是麦角甾醇生物合成的上 游,因此 PMK 也被称为 Erg8。为了研究磷酸甲羟戊酸激酶在米曲霉(Aspergillus oryzae)麦角甾醇合成通路中的作用,对米曲霉 AoErg8 基因功能进行研究。采用生物信息学方法鉴定米曲霉中的该基因,通过系统发育树和酵母异源互补分析其是否保守,利用 实时荧光定量 PCR(RT‑qPCR)检测其表达模式,同时通过荧光蛋白标记对其亚细胞定位进行分析,最后测定 AoErg8 基因过表达 对米曲霉生长和麦角甾醇含量的影响。结果表明,AoErg8 进化保守,其表达量在不同生长时间和不同非生物胁迫下均发生了改变; AoErg8 能恢复酿酒酵母 erg8 突变体的温度敏感表型 ;AoErg8 定位于细胞质中 ;米曲霉中 AoErg8 过表达导致麦角甾醇含量降低, 并且影响米曲霉生长和孢子形成。因此,米曲霉 AoErg8 的功能相对保守,其过表达可以降低麦角甾醇含量并影响菌落生长和孢子 形成。该研究进一步揭示丝状真菌米曲霉麦角甾醇生物合成和调控机理,为米曲霉或其他真菌脂质代谢的基因工程奠定基础。 [ABSTRACT FROM AUTHOR]