背景: 骨髓间充质干细胞可释放大量外泌体, 关于骨髓间充质干细胞来源外泌体对肝细胞凋亡的影响以及具体机制还没有完全阐明。 目的: 探索骨髓间充质干细胞来源外泌体所携带的miR-21-5p对大鼠肝脏细胞凋亡的影响及其作用机制。 方法: 分离大鼠骨髓间充质干细胞, 将miR-21-5p NC或miR-21-5p inhibitor转染到骨髓间充质干细胞中, 采用超速离心法提取外泌体, 命名 为(BMSCs+miR-21-5p NC)-Exos, (BMSCs+miR-21-5p inhibitor)-Exos, 将外泌体与BRL大鼠肝细胞共培养, 观察抑制 miR-21-5p表达后对大鼠肝 细胞凋亡的影响。通过双荧光素酶报告基因检测验证外泌体中miR-21-5p和PIK3R1之间的靶向关系;TUNEL检测外泌体中miR-21-5p直接靶向 PIK3R1激活PI3K/AKT信号通路对BRL大鼠肝细胞凋亡的影响。 结果与结论: ①双荧光素酶报告系统证实, PI3KR1野生型载体与 miR-21-5p mimics共转染293T细胞时的荧光素酶活性显著低于PI3KR1突 变型载体共转染组, 表明miR-21-5p可靶向结合PIK3R1;②TUNEL检测结果显示: 相比于(BMSCs+miR-21-5p NC)-Exos组, (BMSCs+miR-21-5p inhibitor)-Exos处理后BRL肝细胞凋亡率显著增加;与(BMSCs+miR-21-5p NC)-Exos组相比, 加入AKT抑制剂LY294002之后, 细胞凋亡率显著增 加;③结果提示: 外泌体可能通过miR-21-5p直接靶向PIK3R1激活PI3K/AKT信号通路抑制BRL大鼠肝细胞凋亡。 [ABSTRACT FROM AUTHOR]