本研究对猪血浆中半胱氨酸蛋白酶抑制肽进行了制备筛选,并对其抑制动力学和作用机制进行了研究.通过胰蛋白酶酶解制备的猪血浆多肽中,分子量在0~3 kDa的多肽组分抑制率为 35.15%,其抑制活性最高;利用UPLC-Q-TOF联用质谱鉴定,从猪血浆多肽组分中鉴定多肽氨基酸序列,分析得到的多肽氨基酸序列有 35 条,根据目标蛋白来源和细胞定位,选择其中两条氨基酸序列,并命名其为PP1、PP2,PP1 为EAVLGLWGKVNVDEVGGEALGR、长度为 22 aa,分子量为 2 267.2 Da,其蛋白来源为血红蛋白,PP2 为VILGAHEEYHLGEGVQEIDVSK,长度为 22 aa,分子量为 2 421.2 Da,其蛋白来源为纤溶酶原;然后将抑制肽PP1、PP2 与组织蛋白酶L模拟分子对接,分析可知抑制肽与组织蛋白酶L可以通过活性中心紧密结合,分子间作用力键长范围为 1.961 04~5.018 80 ?,其中PP1 作用位点为H3、H4、H6、H14、N15、GLY20、GLN21 和GLY23,组织蛋白酶L的作用位点为H166、H234、H239、H244、H256、H313、LYS117、SER158 和GLU159,分子间作用力主要为氢键,极少部分为静电力,推测其主要通过竞争性抑制酶与底物的结合.上述研究结果可为产品加工的改进提供重要的理论依据,也为研究蛋白酶抑制肽的生理功能提供重要的理论参考.