目的:研究环状RNA MYO9A_006(circMYO9A_006)对心肌细胞肥大表型的调控作用及可能机 制。方法:利用腺病毒介导在乳小鼠心室肌细胞(NMVCs)中过表达circMYO9A_006, 并以腺病毒介导过表达同样 带有绿色荧光蛋白标签的空载体为对照, 检测NMVCs中心肌肥大相关蛋白β-肌球蛋白重链(β-MHC)、骨骼肌肌动 蛋白α1(ACTA1)和心房钠尿肽(ANP)的表达。建立去氧肾上腺素(PE)诱导的乳大鼠心室肌细胞(NRVCs)肥大模 型, 通过鬼笔环肽染色检测过表达circMYO9A_006对NRVCs表面积的影响。双萤光素酶报告基因实验检测circMYO9A_006包含的潜在内部核糖体进入位点(IRES)的活性。通过Western blot实验检测circMYO9A_006翻译蛋白 MYO9A-208aa及其在细胞内分布情况。分别制备circMYO9A_006-ORF(直接表达MYO9A-208aa)和circMYO9A_ 006-ATG-mut(不能表达MYO9A-208aa)重组病毒, 以空载体病毒和circMYO9A_006重组病毒分别感染NRVCs, 检测 circMYO9A_006翻译蛋白MYO9A-208aa对心肌细胞肥大表型的特异调节作用。结果:利用腺病毒可在NMVCs中 有效介导circMYO9A_006过表达。过表达circMYO9A_006可显著抑制NMVCs 中心肌肥大相关蛋白的表达(P< 0. 01), 并显著抑制PE诱导的NRVCs中心肌肥大相关蛋白的表达和细胞表面积的增加(P<0. 05)。双萤光素酶报告 基因实验结果提示, circMYO9A_006包含的2个IRES均具有活性。Western blot检测结果显示, 在NRVCs中过表达 circMYO9A_006可翻译预期大小为28 kD的MYO9A-208aa蛋白, 并主要分布于细胞质中。过表达MYO9A-208aa和 circMYO9A_006可一致地抑制NRVCs心肌肥大相关蛋白表达(P<0. 01), 并可逆转PE诱导的NRVCs肥大反应(P< 0. 05);而过表达circMYO9A_006-ATG-mut没有抑制NRVCs 肥大的作用。结论:circMYO9A_006 通过翻译蛋白 MYO9A-208aa发挥抑制心肌细胞肥大的作用. [ABSTRACT FROM AUTHOR]