The effects of 300 mM urea or 300 mM KCl on the maximal activities of 25 enzymes of intermediary metabolism were assessed in extracts of liver and muscle from spadefoot toads (Scaphiopus couchii), leopard frogs (Rana pipiens), and rats to assess their sensitivity to these osmolytes. During estivation, toads can lose ~50% of total body water, and urea, which is known for its action as a protein denaturant, accumulates to 200–300 mM. The data show that the maximal activities of toad liver enzymes were not affected when assayed in the presence of 300 mM urea in vitro whereas urea inhibited the activities of seven enzymes in frog and 11 enzymes in rat liver. High KCl affected 12 or 13 enzymes in liver of each species causing inhibition in eight or nine cases each, and for frog and rat enzymes, inhibition was frequently more pronounced than for urea. Both urea and KCl affected enzyme activities in muscle extracts of all three species, but whereas their effects were largely negative for frog and rat enzymes, the enzymes affected by urea or KCl in toad muscle were primarily activated by these osmolytes (six out of nine enzymes affected by urea and eight of 15 enzymes affected by KCl). Urea, KCl, and polyethylene glycol (a protein crowding agent) also had species-specific effects on the dissociation constant (K[sub a] ) for cAMP of protein kinase A. The data suggest that the accumulation of urea by water-stressed anurans not only contributes to minimizing cell volume reduction, but by doing so also limits the increase in intracellular ionic strength that occurs and thereby helps to minimize the potential inhibitory effects of high salts on metabolic enzymes.Key words: estivation, desiccation, urea, polyethylene glycol, spadefoot toad, leopard frog.Les effets de l'urée ou du KCl 300 mM sur l'activité maximale de 25 enzymes du métabolisme intermédiaire ont été mesurés dans des extraits de foie et de muscle de crapaud fouisseur (Scaphiopus couchii), de grenouille léopard (Rana pipiens) et de rat afin d'évaluer leur sensibilité à ces osmolytes. Durant l'estivation, le crapaud fouisseur peut perdre environ 50 % de son eau corporelle et l'urée, une substance entraînant une dénaturation de protéines, s'accumule et atteint une concentration de 200 à 300 mM. Les résultats indiquent que l'activité maximale des enzymes hépatiques du crapaud n'est pas modifiée en présence d'urée 300 mM, mais que celle de sept enzymes du foie de grenouille et de 11 enzymes du foie de rat est inhibée par l'urée. Une concentration élevée de KCl modifie l'activité de 12 à 13 enzymes du foie de chacune des espèces, entraînant l'inhibition de huit à neuf enzymes dans chacun des cas. L'inhibition des enzymes de la grenouille et du rat par le KCl est souvent plus forte que celle causée par l'urée. Le KCl et l'urée modifient l'activité des enzymes dans les extraits de muscle des trois espèces, mais alors que les enzymes de la grenouille et du rat sont principalement inhibées, les enzymes du muscle de crapaud sont surtout activées par ces osmolytes (6 des 9 enzymes affectées par l'urée et 8 des 15 enzymes affectées par le KCl). L'urée, le KCl et le polyéthylène glycol (un agent d'entassement des protéines) ont également des effets spécifiques des espèces sur la constante de dissociation (K[sub a] ) de l'AMP cyclique de la protéine kinase A. Ces résultats suggèrent que l'accumulation d'urée dans les anoures soumis à un stress aqueux contribue non seulement à réduire le moins possible le volume cellulaire, mais elle limite également l'augmentation de la force ionique intracellulaire qui s'ensuit et aide ainsi à minimiser les effets inhibiteurs potentiels d'une concentration élevée de sels sur des enzymes métaboliques.Mots clés : estivation, dessiccation, urée, polyéthylène glycol, crapaud fouisseur, grenouille léopard.[Traduit par la Rédaction] [ABSTRACT FROM AUTHOR]