为构建能稳定携带新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)血凝素-神经氨酸酶蛋白(Hemagglutinin-neuraminidase protein,HN)基因的减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统,从pMD18-T-HN中扩增出NDV HN基因,并将其克隆入载体pYA3493-sopENt100,构建重组载体pYA3493-sopENt100-HN,然后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门菌△crp△asdSL1344,并对其重组菌的生长特性、遗传稳定性、表达特性和毒力特性等进行分析.结果显示,携带NDV HN基因的重组减毒鼠伤寒沙门菌△crp△asd SL1344(pYA3493-sopENt100-HN)构建成功;重组菌△crp△asd SL1344(pYA3493-sopENt100-HN)的生长趋势与互补菌△crp△asd SL1344(pYA3493-sopENt100)和缺失菌4crp4asd SL1344相似,与亲本菌株SL1344有明显差异;重组菌能够稳定表达HN基因;减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统能够有效递呈HN基因,并诱导其在鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)内表达;重组菌的LD50与互补菌和缺失菌没有明显差异,与亲本菌株SL1344差异较大.以上结果表明,成功构建了携带NDVHN基因的新型减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统△crp△asd SL1344(pYA3493-sopENt100-HN),能够有效递呈NDV HN基因并使其高效表达,且安全性高,遗传稳定.