为进一步提高果胶酶的产量,采用响应面法优化了Bacillus subtilis Z-5产果胶酶的发酵培养基和发酵条件,并将优化后得到的果胶酶应用于梨汁澄清实验.通过单因素实验探究 9个因子对B.subtilis Z-5产果胶酶活力的影响,然后采用Plackett-Burman试验设计筛选出 3个显著影响产酶的因素:酵母粉含量、pH、培养时间;再结合响应面设计法确定了最佳的发酵条件.结果表明最佳的发酵培养基成分是果胶 10 g/L,酵母粉 7.99 g/L,MgSO4·7H2O 0.5 g/L;最佳的发酵条件为初始pH5.66,发酵温度 37℃,培养时间 72 h,接种量为 6%(v/v),装液量 50/250 mL,底物浓度为 10 g/L;在此基础上,B.subtilis Z-5产果胶酶酶活力由 879.00 U/mL提高到1549.62 U/mL,是优化前的 1.76倍.在梨汁澄清实验中表明果胶酶的最适添加量为 4 mL,最适酶解时间为 2.5 h,最适酶解温度为 65℃,最适酶解pH为 6.0,此时透光率最大为 79.77%,与商品酶相比,自制果胶酶是一种具有多种酶系复合酶,可作用于梨汁中含有的蛋白、淀粉等其他成分,使得梨汁更加澄清.本研究结果为果胶酶的工业化生产和应用提供了理论支撑.