目的 研究不同时间电刺激模拟不同强度运动对C2C12肌管线粒体氧化应激水平的影响,并进一步探讨5'磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)信号通路在不同运动强度过程中所发挥的作用.方法 C2C12肌管分化7d后给予1次电刺激,刺激强度为15V,30 ms,3Hz,刺激时间分别为0、60、120和180 min.实验共4组,对照组(Con);电刺激60 min组(E60),120 min(E120)和180 min(E180).细胞电刺激处理后于倒置显微镜观察肌管形态;试剂盒法检测脂质过氧化产物(MDA)和活性氧自由基(ROS);流式细胞技术检测线粒体ROS和膜电位;免疫蛋白印迹法检测PGC1、AMPK-Ser485、AMPK-Thr172、AMPK的蛋白表达.结果 不同时间的电刺激后,C2C12肌管的形态无显著差异;电刺激60 min,MDA、ROS、AMPK-Ser485和AMPK-Thr 172显著上升(P<0.05);电刺激120 min和180 min,MDA、ROS、线粒体ROS、AMPK-Ser485、PGC1显著上升(P<0.05),线粒体膜电位显著下降(P<0.05).结论 电刺激导致肌管氧化应激,且随时间延长,线粒体氧化应激程度越强烈,线粒体损伤越严重;AMPK-Thr172调控中长时间电刺激引起的氧化应激,而AMPK-Ser485及PGC1调控超长时间电刺激引起的氧化应激.