A babesiose tem sido descrita como uma das principais enfermidades na equideocultura brasileira, gerando consideráveis perdas econômicas, o que exige diagnóstico rápido e eficaz. O objetivo deste estudo foi comparar a sensibilidade de três técnicas diagnósticas diretas na detecção dessa doença, sendo elas:a pesquisa do hemocitozoário em esfregaços de sangue total, periférico eobtido por punção esplênica. Foram submetidos ao estudo 13 equinos com faixa etária entre 07 e 20 anos e peso médio de 341 kg. As coletas foram realizadas entre os meses de janeiro e março de 2014. Das técnicas avaliadas, o esfregaço sanguíneo de punção esplênica apresentou maior sensibilidade na identificação de animais positivos quando comparado às demais.