目的探讨钙周期素结合蛋白(CaeyBP)对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响 及其分子机制。方法选取2016 年于济南市中心医院行手术治疗的非小细胞肺癌患的肺癌组织和 正常癌旁组织标本各6例,采用Westem blot法检测肺癌和正常癌旁组织中 CaeyBP 蛋白的表达水平, Western blot 和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常支气管上皮细胞 16HBE 和不同非小细胞肺 癌细胞系(A549,H1299 H460 和 H1975)中 CaeyBP 蛋白和 mRNA 的表达水平。将=RNA,CaeyBP-1、 siCneyBP-2.慢病毒包装质粒 NC 和 shCaeyBP 转染至 A549细胞(分别记为 siNC组、iCaeyBP-1组, iCaeyBP-2组、NC组和 shCutyBP组),将对照质粒和 Flag-CaeyBP 质粒转染至 A549 细胞(分别记为 NC组和 Flag-CaeyBP组) 采用细胞计数试剂盒8法,平板克隆实验以及流式细胞术检测细胞增殖 能力以及细胞周期情况,细胞划痕和 Transwell 实验检测细胞迁移和侵袭能力,Westem blot法检测敲 低或过表达 CacyBP A549细胞中E-cadherin、N-cadherin Snaill Vimentin 和磷酸化蛋白激酶 B(p-Akt) 的表达。结果CareyBP 蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达水平为041±0.23,高于正常癌旁组织 (0.11±0.04,P<005)。不同非小细胞肺癌细胞系(A549 H1299 H460 和 H1975) CaeyBP 蛋白的表达 水平分别为035±0.01.0.38±0.01.0.32±001 和0.41±001,均高于16HBE 细胞(003±0.01.均P< 005);RT-PCR结果与 Western blot 结果一致。与siNC组 吸光度(A)值为1.54±0.03 |比较, siCaeyBP-1组和siCaeyBP-2 组细胞增殖能力降低(分别为1.38±0.04和1.34±0.03.均P<005)。NC 组细胞克隆形成数为(41.33.3.21)个,高于 shCaeyBP 组(22.00±361)个, P<0.05]hCacyBP 组细 胞G 期占比为(61.35±5.45)%,高于shNC组(49.61±1.54)%,P<005];期占比为(25.41± 3.21)%,低于shNC组(38.68±0.460%,P<0.05) shacyBP 组细胞迁移率为(12.67±0.710%,低于 ANC组(35.50±2.07)%,P<0.05] NC 组细胞迁移和侵袭的数量分别为(40633±7.37)个和 (9233-850)个,高于 CarevBP 组[ 分别为(22467±10.01)个和(66.00±7.94)个,均P<0.05] 与 HiNC组相比,敲低 CaevBP 的表达,E-endherin 的表达水平升高,N-cadherin Vimentin Smill 和n-Akr 的表达水平降低(均 P < 0.05 与NG组相比,Flag-CneyBP组 E-cadherin 的表达水平降低,N cadherin Vimentin Sumill 和 p-Akt 的表达水平升高(均P<0.05).PI3K/Akt通路抑制剂 LY294002 可逆 转上述结果 结论 CarryBP 通过调控 Ak 通路的活性促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭。 [ABSTRACT FROM AUTHOR]