敲降 Ras 相关结合蛋白 23 表达对食管鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移的影响及机制.
- Resource Type
- Article
- Authors
- 马刚; 梁寒; 张汝鹏; 孙意
- Source
- Chinese Journal of Oncology. Feb2024, Vol. 46 Issue 2, p108-117. 10p.
- Subject
- Language
- Chinese
- ISSN
- 0253-3766
目的探讨Ras相关结合蛋白23(RAB23)在食管鳞状细胞癌(简称食管鳞癌)细胞侵袭和迁移中的作用和机制。 方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测16例配对食管鳞癌及癌旁正常组织中RAB23 mRNA的表达。比较基因表达综合(GEO)数据库的GSE20347数据集中食管鳞癌和配对癌旁正常组织RAB23 mRNA的表达水平。免疫组织化学检测106例配对食管鳞癌和癌旁正常组织、33例淋巴结阳性与10例淋巴结阴性患者原发灶与淋巴结组织中RAB23蛋白含量。在食管鳞癌KYSE30和KYSE150细胞中瞬时敲降RAB23表达(转染si-RAB23-1和si-RAB23-9)或者稳定敲降RAB23表达(转染sh-RAB23),采用Western blot法验证RAB23敲降效率,采用细胞计数试剂盒8法和裸鼠皮下成瘤实验检测食管鳞癌细胞的增殖能力,采用Transwell实验和裸鼠尾静脉-肺转移实验检测食管鳞癌细胞的侵袭和迁移能力,采用细胞黏附实验检测食管鳞癌细胞的黏附能力,采用转录组测序技术分析RAB23敲降后对细胞转录谱的影响,并通过Western blot检测验证相关信号通路。 结果16例食管鳞癌组织中RAB23 mRNA表达水平为0.009 7±0.008 9,高于癌旁正常组织[0.003 2±0.003 7, P=0.006]。对GEO数据库GSE20347数据集中食管鳞癌和配对癌旁正常组织表达谱的生信分析显示,食管鳞癌组织中RAB23 mRNA表达水平为4.30±0.25,高于癌旁正常组织(4.10±0.17, P=0.037)。106例食管鳞癌组织中,51例RAB23低表达,55例RAB23高表达;而配对癌旁正常组织中,82例RAB23低表达,24例RAB23高表达,食管鳞癌组织中RAB23表达水平高于配对癌旁正常组织( P<0.001)。33例淋巴结阳性食管鳞癌组织中,1例RAB23低表达,32例RAB23高表达;10例淋巴结阴性的食管鳞癌组织中,3例RAB23低表达,7例RAB23高表达。淋巴结阳性食管鳞癌组织中RAB23表达水平高于淋巴结阴性食管鳞癌组织( P=0.024)。33例阳性淋巴结组织中,1例RAB23低表达,32例RAB23高表达,而10例阴性淋巴结组织中均为RAB23低表达。阳性淋巴结组织中RAB23表达水平高于阴性淋巴结组织( P<0.001)。瞬时或稳定敲降RAB23后,KYSE30细胞体外和体内的增殖能力无明显变化,KYSE30细胞的细胞侵袭和迁移能力下降,而KYSE150细胞仅侵袭能力下降,迁移能力无明显变化。sh-RAB23组KYSE30细胞黏附细胞的数量为(313.75±89.34)个,少于sh-NC组[(1 030.75±134.29)个, P<0.001]。sh-RAB23组KYSE150细胞的黏附细胞数为(710.5±31.74)个,也少于sh-NC组[(1 005.75±61.09)个, P<0.001]。转录组测序分析显示,敲降RAB23后,si-RAB23-1组和si-RAB23-9组KYSE30细胞中黏着斑相关信号通路均被削弱,sh-RAB23组KYSE30和KYSE150细胞中p-FAK和p-paxillin表达水平降低。 [ABSTRACT FROM AUTHOR]