【目的】明确鸡肿瘤坏死因子受体相关因子相互作用的具有叉形头相关结构域蛋白 (TIFA) 和肿瘤坏死因子受体相关因子 6(TRAF6) 的分子特征及其基因在鸡免疫器官中的表达特性, 为后续深入研究 TIFA 和 TRAF6 相互作用调控家禽病毒 NDV 复制的作用机制提供理论依据。【方法】采用生物信息学软件结合实时荧光定量 PCR(RT-qPCR) 方法, 通过分析鸡 TIFA 和 TRAF6 蛋白的理化性质、二级结构、三级结构、氨基酸同源性和结构域保守性及其在 1~6 月龄白来航鸡和新城疫病毒 (NDV) 感染 SPF 鸡后第 3~5 天的免疫器官 (脾脏、胸腺和法氏囊), 分别检测鸡免疫器官中 TIFA 和 TRAF6 基因的表达水平, 进而研究鸡 TIFA 和 TRAF6 蛋白的分子特征及其基因在免疫器官中的表达特性。【结果】鸡 TIFA 和 TRAF6 蛋白分别含有 187 和 545 个氨基酸残基, 相对分子量约为 21.8 和 61.9 kDa, 其二级结构均主要由无规则卷曲和α-螺旋组成。氨基酸同源性分析结果表明, 鸡与火鸡 TIFA 和 TRAF6 蛋白的氨基酸同源性最高, 分别为 97.3% 和 98.2%, 而与猪 TIFA 及小鼠 TRAF6 蛋白的氨基酸同源性最低, 分别为 51.1% 和 74.7%。同时, 鸡 TIFA 蛋白的 FHA 结构域及 TRAF6 蛋白的 RING、Zinc finger 和 MATH 结构域均在禽类中保守性高。RT-qPCR 分析结果表明, 鸡 TIFA 和 TRAF6 基因在 1~6 月龄鸡免疫器官中均存在表达, 但在脾脏中的相对表达量最高 (47.94 和 10.84), 而在法氏囊中最低 (8.08 和 2.01), 其中, TIFA 基因在1月龄鸡免疫器官中表达量最高 (22.15), 在6月龄时最低 (1.11), 呈先减后增再减趋势, 整体表达趋势呈倒“N”型模式;TRAF6 基因在 4 月龄鸡免疫器官中表达量最高 (7.13), 在5月龄时最低 (1.05), 呈先降后升再降再升趋势, 整体表达趋势呈“W”型模式。在 NDV 感染 SPF 鸡后的免疫器官中, TIFA 和 TRAF6 基因的相对表达量均显著高于对照, 其中, TIFA 基因在第 3 天的鸡脾脏、第 4 天的鸡胸腺和法氏囊中的表达量最高, 而 TRAF6 基因则在第 3 天的鸡脾脏、第 5 天的鸡胸腺和法氏囊中的表达量最高。【结论】鸡 TIFA 和 TRAF6 蛋白在禽类中的保守性高, 两者在不同月龄鸡和 NDV 感染鸡的免疫器官中呈不同的表达水平和表达变化趋势, 其参与的先天性免疫应答可能在抵抗 NDV 感染过程中发挥一定作用。 [ABSTRACT FROM AUTHOR]