目的 探究 12 号染色体开放阅读框 66(C12ORF66)对 MYCN 扩增神经母细胞瘤(NB)细胞系活性的调控效应. 方法 通过R2数据库GSE16476和 GSE49710 数据集, 分析MYCN扩增和MYCN非扩增NB细胞中 C12ORF66表达量, 以及 C12ORF66表达量与患儿预后的相关性. RT-qRCR检测正常组织永生化细胞系, MYCN扩增及MYCN非扩增细胞系中 C12ORF66 mRNA表达差异. 构建瞬时敲低和稳定敲低 C12ORF66的MYCN扩增细胞株, 对照组和敲低组细胞进行实时无标记动态细胞分析(RTCA), 集落形成能力检测及Ki67免疫荧光染色. 结果 R2 数据库分析显示 MYCN 扩增 NB 患儿样本中 C12ORF66 表达显著高于MYCN非扩增NB患儿样本, 并且 C12ORF66表达与患儿预后负相关(P<0.05). 细胞实验表明, 与MYCN非扩增细胞系 CHLA-255 和SH-SY5Y相比, C12ORF66在MYCN扩增细胞系BE(2)-C和SK-N-BE(2)中表达显著升高(P<0.001). 瞬时或稳定敲低 C12ORF66, MYCN 扩增NB细胞增殖显著减缓 (P<0.001), 集落形成能力显著降低(P<0.001), Ki67阳性细胞比例显著减少(P<0.05). 结论 C12ORF66在MYCN扩增NB患儿样本和细胞系中高表达, 且与患儿预后负相关, 敲低C12ORF66显著抑制NB细胞活性. [ABSTRACT FROM AUTHOR]