敲低 NIPBL 基因调控小鼠骨髓间充质干细胞向软骨的分化.
- Resource Type
- Article
- Authors
- 马雯晴; 张惠荣; 刘 辉; 董丽丽; 杨眷娣
- Source
- Chinese Journal of Tissue Engineering Research / Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 4/8/2023, Vol. 23 Issue 10, p1477-1483. 7p.
- Subject
- *MESENCHYMAL stem cells
*BONE marrow
*SKELETAL dysplasia
*MUCOPOLYSACCHARIDES
*GENETIC mutation
*CARTILAGE cells
- Language
- Chinese
- ISSN
- 2095-4344
背景:目前已将 NIPBL 基因突变作为诊断 Cornelia de Lange 综合征的首选指标,但由于该病的遗传异质性,显著增加了临床诊疗难度,尤其 患儿骨骼发育畸形的发生率高,其发病机制尚不明确,目前无有效治疗方案,患儿平均寿命较一般人群显著缩短。 目的:探究敲低NIPBL 基因对小鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化能力的影响及其可能的分子调控机制。 方法:将慢病毒转染 NIPBL shRNA 的小鼠骨髓间充质干细胞作为 sh-NIPBL 组,慢病毒空载体转染的骨髓间充质干细胞作为 sh-NC 组,无慢病 毒干扰的骨髓间充质干细胞作为空白对照组,对上述 3 组细胞进行成软骨诱导培养,诱导 21 d 后测量软骨微球最大横截面的周长,行阿利 辛蓝染色鉴定其诱导分化结果,免疫荧光法检测软骨细胞Ⅱ型胶原的表达水平,应用实时荧光定量 PCR 法检测软骨细胞 Sox-9、TGF-β1、 Smad2、Smad4 mRNA 表达水平。 结果与结论:① 成软骨诱导第21天,sh-NIPBL组的软骨微球最大横截面的周长明显小于对照组 (P < 0.05),阿利辛蓝染色后在倒置显微镜下 观察 sh-NC 组较 sh-NIPBL 组可见更多的蓝色软骨内酸性黏多糖;② 诱导成软骨分化后,sh-NIPBL 组骨髓间充质干细胞中Ⅱ型胶原、Sox-9的表 达低于 sh-NC 组和空白对照组 (P < 0.05);③ 成软骨诱导过程中,sh-NIPBL 组 TGF-β1、Smad2、Smad4 基因的表达水平低于 sh-NC 组和空白对照 组 (P < 0.05); ④ 结果表明,慢病毒敲低 NIPBL 基因表达降低了骨髓间充质干细胞的成软骨分化能力,且该过程可能由TGF-β1/Smad 信号通路 参与介导。 [ABSTRACT FROM AUTHOR]