目的 建立一种高效的 NK细胞体外扩增培养方法;通过检测 NK 细胞杀伤 3 种前列腺癌(PCa)细胞株的效率,鉴定其用于后期治疗PCa的可行性,为应用 NK细胞过继回输治疗 PCa 的研究奠定基础.方法 通过细胞因子对外周血单个核细胞(PBMCs)的诱导扩增,培养出 NK 细胞并用流式细胞术检测 NK 细胞所占比例以及扩增倍数;通过CCK8 法检测 NK 细胞杀伤 3 种 PCa 细胞株 PC3、LNCaP、DU145 的效率及效靶比.结果 NK 细胞诱导扩增成功,PBMCs诱导扩增后,NK 细胞由最初的(10.97±3.28)%,扩增到占比(83.20±8.54)%以上,细胞总数扩增倍数为(251.66±19.05)倍,NK细胞扩增倍数为(1 940.17±402.22)倍.NK 细胞对 3 种靶细胞的杀伤率差异极显著(P<0.01);NK细胞对 LNCaP的杀伤效率大于对DU145 的杀伤效率;对于PC3 没有杀伤作用,反而促进其生长.NK 细胞对PCa细胞株的最高杀伤效率分别为 LNCaP(92.03±9.95)%、DU145(72.40±8.30)%、PC3(26.69±10.56)%.结论 采用细胞因子诱导扩增PBMCs的方法能够获得纯度较高、数量足够的 NK 细胞,为 NK 细胞的临床应用奠定基础;NK细胞对 3 种PCa细胞系的杀伤率差异极显著,为后续进行深入研究探索原因及作用机制提供了方向.